研究進(jìn)展 | 如何構(gòu)建特應(yīng)性皮炎脾虛濕蘊(yùn)證小鼠模型

研究進(jìn)展 | 如何構(gòu)建特應(yīng)性皮炎脾虛濕蘊(yùn)證小鼠模型

廣州中醫(yī)藥大學(xué)陳達(dá)燦、晏烽根團(tuán)隊(duì)發(fā)表于《中藥新藥與臨床藥理》的研究論文建立了 “外濕 + 飲食失節(jié) + 番瀉葉灌胃" 復(fù)合因素結(jié)合 DNCB 誘導(dǎo)的特應(yīng)性皮炎脾虛濕蘊(yùn)證病證結(jié)合小鼠模型，為中醫(yī)藥干預(yù)特應(yīng)性皮炎的機(jī)制研究、藥效評(píng)價(jià)提供了工具。

研究背景

特應(yīng)性皮炎是高發(fā)的慢性炎癥性皮膚病，中醫(yī)將其歸為 “四彎風(fēng)" 范疇，嶺南地區(qū)患者多表現(xiàn)為 “脾虛濕蘊(yùn)證"—— 脾胃運(yùn)化失調(diào)致濕邪內(nèi)生、郁于肌膚，引發(fā)皮損滲液、反復(fù)發(fā)作。但此前缺乏同時(shí)具備 “特應(yīng)性皮炎病理特征" 和 “脾虛濕蘊(yùn)證中醫(yī)指征" 的動(dòng)物模型，制約了中醫(yī)藥作用機(jī)制的研究。

模型構(gòu)建

團(tuán)隊(duì)采用 Balb/c 小鼠分 4 組實(shí)驗(yàn)（正常組、AD 組、脾虛濕蘊(yùn)證組、脾虛濕蘊(yùn)型 AD 組），創(chuàng)新構(gòu)建模型：

1.       脾虛濕蘊(yùn)證誘導(dǎo)：95% 高濕環(huán)境飼養(yǎng)（外濕）+ 單日高脂飼料 / 雙日禁食（飲食失節(jié)）+ 番瀉葉冷浸液灌胃（加重脾虛），全程持續(xù)至取材；

2.       特應(yīng)性皮炎誘導(dǎo)：第 19 天起背部剃毛，先后用 1% DNCB 致敏、0.5% DNCB 激發(fā)，每周 3 次持續(xù) 3 周，模擬 AD 病理?yè)p傷。

檢測(cè)工具

研究中，團(tuán)隊(duì)采用ASCH VAPOSCAN 經(jīng)皮水分流失測(cè)量?jī)x作為皮膚屏障功能的評(píng)價(jià)工具，在室溫 23-26℃、濕度 40%-55% 的標(biāo)準(zhǔn)化條件下，通過(guò)探頭緊貼小鼠背部皮損區(qū)，快速獲取經(jīng)皮水分流失（TEWL）值，反映皮膚屏障完整性：

•       與單純 AD 組相比，脾虛濕蘊(yùn)型 AD 組的 TEWL 值呈上升趨勢(shì)，表明脾虛濕蘊(yùn)證會(huì)加重皮膚屏障損傷；

•       結(jié)合 EASI 評(píng)分（皮損嚴(yán)重程度）發(fā)現(xiàn)，脾虛濕蘊(yùn)型 AD 組皮損紅斑、腫脹、糜爛更嚴(yán)重，且 EASI 評(píng)分高于單純 AD 組（P<0.05），證實(shí)模型同時(shí)具備 “證" 與 “病" 的雙重特征。

研究發(fā)現(xiàn)

2.       宏觀表現(xiàn)：脾虛濕蘊(yùn)型 AD 組小鼠出現(xiàn)肥胖、精神萎靡、毛發(fā)污穢油膩、腹瀉等典型脾虛濕蘊(yùn)證表現(xiàn)，體質(zhì)量下降幅度大于單純 AD 組（P<0.05）；

3.       免疫指標(biāo)：脾虛濕蘊(yùn)證會(huì)加重 AD 導(dǎo)致的胸腺系數(shù)降低（P<0.05），提示免疫系統(tǒng)損傷更明顯；

4.       生化指標(biāo)：脾虛濕蘊(yùn)型 AD 組小鼠葡萄糖、胃泌素水平升高（P<0.05），淀粉酶水平降低，符合脾虛濕蘊(yùn)證的代謝特征。

研究意義

該模型同時(shí)再現(xiàn)了特應(yīng)性皮炎的病理?yè)p傷（紅斑、屏障受損）和脾虛濕蘊(yùn)證的中醫(yī)指征（腹瀉、代謝紊亂），解決了傳統(tǒng) AD 模型缺乏中醫(yī)證候特征的問(wèn)題?？蔀楹罄m(xù)脾虛濕蘊(yùn)型特應(yīng)性皮炎的病理機(jī)制研究、中藥復(fù)方藥效評(píng)價(jià)、藥理靶點(diǎn)篩選提供可靠的實(shí)驗(yàn)載體，推動(dòng)中醫(yī)藥治療皮膚病的現(xiàn)代化研究。

參考文獻(xiàn)：

[1] 鐘婷靖，劉秦，黎雄，等。特應(yīng)性皮炎脾虛濕蘊(yùn)病證結(jié)合動(dòng)物模型的構(gòu)建與評(píng)價(jià) [J]. 中藥新藥與臨床藥理，2024, 35 (6): 862-869. 

[2] Li X, Feng L Y, Zhong T J, et al. Gu-Ben-Hua-Shi (AESS) formula ameliorates atopic dermatitis via regulating NLRP3 signaling pathways[J]. Saudi Pharmaceutical Journal, 2023, 31: 101792.